液相色谱柱：分类、选择与堵塞处理全攻略_液相色谱柱 的分类选择与故障处理技巧

液相色谱柱：分类、选择与堵塞处理全攻略

液相色谱柱 的分类选择与故障处理技巧

1、啥是液相色谱柱？液相色谱柱是液相色谱仪的核心部件，像一个精密分离器，把混合物里各成分分开，靠的是不同物质在固定相和流动相之间分配系数差异。

2、液相色谱柱分类，从固定相不同分，有正相液相色谱柱和反相液相色谱柱。正相柱固定相极性强，流动相极性弱，适合分离极性化合物。

3、反相液相色谱柱呢，固定相极性弱，流动相极性强，应用超广泛，多数有机物、药物都靠它分离。

4、按尺寸分，有常规柱、短柱、微径柱。常规柱常见，内径4.6mm左右，长度15 - 25cm。短柱分离快，分析时间短。微径柱省流动相。

5、选液相色谱柱，先看样品性质。极性大的，正相柱可能合适；极性小的，反相柱更靠谱。像分析极性小的药物，反相液相色谱柱就常用。

6、再看分析目的。要快速分析，短柱优先；追求高分离度，长点的常规柱可能更好。

7、流动相也得考虑。有的液相色谱柱对流动相pH值范围有要求，选柱时得注意。比如一些硅胶基质柱，pH在2 - 8范围使用合适。

8、柱效是关键指标，柱效高，分离效果好。看柱效参数，像理论塔板数，越高柱效越高。

9、液相色谱柱寿命也重要，耐用的柱子能省成本。了解柱子材质、键合相类型，判断寿命长短。

10、选柱子品牌和口碑不能忘，大品牌质量更稳定，售后也有保障。

11、要是液相色谱柱堵了，别慌。先停泵，关检测器，防止损坏设备。

12、看看压力变化，压力突然升高，可能堵了。要是刚换流动相堵的，可能是流动相里有杂质。

13、把柱子从仪器上拆下来，用流动相反向冲洗。低流速，0.2 - 0.5mL/min，冲半小时到一小时。

14、冲洗时观察压力，压力降了，可能堵的地方通了。要是压力不降，换冲洗溶剂。

15、对于反相液相色谱柱，先用甲醇 - 水混合液冲，比例从低到高，比如5%甲醇 - 水到100%甲醇。

16、正相柱用正己烷、二氯甲烷等冲洗。冲洗溶剂得是色谱纯，防止二次堵塞。

17、冲洗完，再用流动相平衡柱子，流速慢点，稳定后再进样分析。

18、要是反向冲洗不行，试试正向冲洗。不过正向冲洗可能把杂质冲到柱子深处，谨慎用。

19、还可以超声清洗。把柱子拆下来，放超声仪里，用合适溶剂超声。超声时间别太长，10 - 15分钟就行。

20、超声完，用流动相冲洗平衡。要是超声也不行，可能柱子里杂质太顽固。

21、试试用专门的柱子清洗剂，按说明操作。但清洗剂可能伤柱子，用前看好柱子说明书。

22、要是以上方法都不行，可能柱子报废了，只能换个新的液相色谱柱。

23、日常使用液相色谱柱，预防堵塞很重要。流动相要过滤，用0.45μm或0.22μm滤膜。

24、样品也得处理好，离心、过滤，去掉杂质。进样量别超柱子负荷。

25、做完实验，及时冲洗柱子。反相柱先用高比例水相冲洗，再用纯有机相保存。

26、正相柱用正相溶剂冲洗后保存。保存温度别太高，一般室温就行。

27、不同品牌、型号液相色谱柱有差异，按说明书操作。

28、使用新柱子前，看说明书里的保存条件和活化方法。活化好，柱子性能才稳定。

29、定期检查柱子性能，像柱效、峰形。发现柱效下降、峰形变差，及时处理。

30、如果长期不用液相色谱柱，要定期拿出来冲洗维护，防止柱子干掉、堵塞。

31、反相液相色谱柱常用，保存时注意，纯乙腈比纯甲醇好，乙腈凝固点低，不易冻住。

32、正相液相色谱柱保存，要密封好，防止流动相挥发、柱子吸水。

33、液相色谱柱使用中，温度也有影响。有的柱子对温度敏感，控制好柱温，保证分离效果稳定。

34、柱温箱能控制温度，选合适温度，提高柱效和分离度。

35、换流动相时，要过渡，防止柱子收缩、膨胀，损坏固定相。

36、比如从水相到有机相，用梯度洗脱方式，逐渐改变比例。

37、总之，了解液相色谱柱分类，选对柱子，做好堵塞预防和处理，能让液相色谱分析更准确、高效。